科创中国

生物与新医药技术

在生物医学领域，利用常规转染将质粒载体转到哺乳动物细胞中是使用最广泛的方法。虽然近年来开发了不少更为先进的基因导入载体系统（如慢病毒载体、腺病毒载体、AAV载体和piggyBac等），但常规质粒基因表达载体仍被大多数实验室使用，这主要得益于其在技术上的简便性以及在各种类型细胞中的高效转染率。常规质粒载体转染的关键特点是短暂性，并且在宿主基因组中的整合效率非常低（通常小于1%）。 载体DNA非整合型：常规质粒在细胞里主要以游离DNA状态存在，所以常规质粒转染也称为瞬时转染。然而，质粒DNA也可以以非常低的概率永久整合到宿主基因组中（质粒转染每102~106个细胞可能会有一个细胞的基因组被整合，整合效率取决于细胞类型）。如果将携带了药物抗性基因或者荧光标记基因的载体转到细胞中，在经过扩大和传代培养后，可以使用药物筛选或细胞分选来获得稳定整合了该载体的细胞。 可转染的细胞类型受限：不同类型细胞的质粒转染效率差异很大。非分裂细胞比分裂细胞更难转染，原代细胞比永生化细胞系更难转染。一些重要的细胞类型更是难以转染，如神经元和胰岛β细胞。另外，质粒转染局限于体外细胞实验，很少运用到活体实验。

载体系统已经过优化，其在大肠杆菌中具有高拷贝复制能力，且对细胞具有高效转染率。根据用户选择的筛选标记基因，可对转染了该载体的细胞进行筛选或者可视化追踪。 优势： 1技术简单：常规转染即可把质粒转入细胞，相比起病毒载体需要进行病毒包装，过程更简单。 2载体容量非常大：我们的载体总容量可达30 kb，其中质粒骨架只占3 kb，有足够大的容量可以放置客户所感兴趣的序列。 3高水平表达：常规质粒转染细胞后，可以产生非常高的拷贝数（每个细胞多达几千拷贝），使外源基因能高水平表达。

云舟生物是引领全球基因递送技术的创新型企业，提供包括基因递送方案的设计研发与优化、科研用载体定制和临床用载体制备等全产业链服务，并凭借强大的原研能力，致力于系统性攻克基因递送行业的关键技术瓶颈，赋能基础科研，加速基因药物的临床应用，提升人类健康水平。