成果介绍
本发明发现了一种筛选蛋白激酶A抑制剂高通量筛选方法,包括以下步骤:(1)蛋白激酶A抑制剂筛选模型的建立与优化:进行激酶浓度、温孵时间、底物浓度、ATP浓度实验;(2)阳性药验证模型可靠性:选用合适浓度的激酶,ATP?Km,底物Km,激酶和底物每孔分别加入2μl,再按浓度梯度每孔加入4μl阳性药,加入2ul?ATP开始反应,按优化时间室温孵育;每孔加入10μl终止液终止反应,室温孵育1小时后检测,分析数据得阳性药IC50;(3)高通量筛选模型验证:按照上述步骤操作,使用Biomek?NXP自动化加样仪器和Multidrop自动分液器进行加样,计算Z因子。本发明的优点主要有:1)简便快捷;2)灵敏度高;3)结果稳定可靠,重现性好,可用于高通量筛选。
成果亮点
发现了一种筛选蛋白激酶A抑制剂高通量筛选方法,本发明的优点主要有:1)简便快捷;2)灵敏度高;3)结果稳定可靠,重现性好,可用于高通量筛选。
团队介绍
中国药科大学( China Pharmaceutical University )位于江苏省 南京市 ,是 中华人民共和国教育部 直属的多科性重点大学,是国家“ 世界一流学科建设高校 ”、国家“ 211工程 ”和“ 985工程优势学科创新平台 ”建设高校,入选国家“ 111计划 ”、教育部“ 卓越工程师教育培养计划 ”、 国家大学生创新性实验计划 、 国家级大学生创新创业训练计划 、 国家建设高水平大学公派研究生项目 、 国家级新工科研究与实践项目 ,中美药学院校联盟牵头单位。 中国药科大学始建于1936年,原名 国立药学专科学校 (本科四年制),是中国第一所由国家创办的药学高等学府。
成果资料