高效合成丙酮酸与D-丙氨酸的工程菌及其构建方法与应用

本发明公开了一种高效合成丙酮酸与D 丙氨酸的工程菌及其构建方法与应用。本发明在基因工程菌株BLK07(pET20b pm1)的基础上,通过定点饱和突变筛选到了pm1酶活提高的菌株,并通过在pm1基因序列N端插入N端编码序列(NCS),提高了pm1的蛋白表达量,提高了丙酮酸的产量,显著缩短了催化时间,提高了催化效率。当底物D,L 丙氨酸浓度为110g/L,细胞浓度为4g/L,催化体系在摇瓶中37℃、220rpm只催化8h时,丙酮酸的产量即可达到最大值***,L 丙氨酸的转化率为***%,D/L 丙氨酸的拆分率达到***%。