一种辅助全细胞转化合成L-天冬酰胺的方法

本发明公开了一种辅助全细胞转化合成L 天冬酰胺的方法,本发明利用Ⅲ类多聚磷酸激酶2构建了单酶转化AMP再生ATP的系统,并将其应用于L 天冬酰胺的生物合成。将来自Deinococcus ficus的Ⅲ类PPK2在Escherichia coli Rosetta(DE3)中表达,酶活力为***·mL 1。以*** Rosetta(DE3)/pET21a DfiPPK2 Ⅲ和*** WB600/pMA5 LsaAS A全细胞为催化剂催化L Asp合成L Asn并优化反应条件。结果显示两种重组菌湿细胞在最优反应条件下,并通过两次补料终浓度为60mmol·L 1的六偏磷酸钠,L Asn的得率到达***%,比直接添加180mmol·L 1的六偏磷酸钠高80%。