科创中国

（1）任务来源

本课题为甘肃省中医药管理局2016年资助的科研立项课题，课题编号：GZK-2016-17，实际资助经费：3.8万元。

（2）研究目的及意义

本研究通过体外培养大鼠BMSCs，并运用血清药理学理论方法制备固本增骨胶囊含药血清，观察固本增骨胶囊含药血清对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨分化的效应，检测成骨分化标志蛋白的表达、细胞内分布和细胞生物学行为，并采用microRNA芯片技术和生物信息学方法，通过差异microRNA表达谱的分析（KEEG信号通路富集分析），寻找关键分子与信号通路，探讨固本增骨胶囊促进BMSCs成骨分化的分子机制及效应靶点，阐明“骨枯髓空”的物质基础及固本增骨胶囊治疗OP的作用机制。

（3）主要技术性指标

完成固本增骨胶囊含药血清制备，wistar大鼠BMSCs的体外培养，MTT法检测细胞增殖活力，茜素红染色比表各组成骨分化情况，BMSCs及BMSCs培养液中ALP活力检测；PCR法检测各组BMSCs中Wnt/β-catenin通路转录因子的表达，Western-Blot法检测各组成骨因子collagen-Ⅰ、BGP、Runx2蛋白表达； PCR法检测各组BMPs通路中BMP2、BMP4、Smad1、RUNX2基因表达水平，ELISA法检测各组成骨因子collagen-Ⅰ、BGP、Runx2蛋白的表达； PCR法检测各组BMSCs中Notch通路Notch1、CBF1 mRNA的表达，Western-Blot法检测各组BMSCs中RUNX2、Col-Ⅰ、BGP蛋白的表达。完成研究报告1份，发表学论文23篇，其中CSCD论文20篇。完善学科梯队建设，培养博士研究生1名，硕士研究生3名，1名中级人员晋升高级职称。