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一种发酵生产γ-氨基丁酸的方法
发布时间: 2022-05-16
基本信息
合作方式：
技术转让
成果类型：
发明专利
行业领域：
其他
成果介绍
- 本发明公开了利用一种发酵生产γ-氨基丁酸的方法,是将两种谷氨酸脱羧酶基因gadB1,gadB2构建共表达载体导入到谷氨酸生产菌中构建基因工程菌,利用基因工程菌表达的谷氨酸脱羧酶将其自身积累的谷氨酸脱去一个羧基合成出γ-氨基丁酸。通过对种子培养基、发酵培养基和发酵条件优化,尤其是尿素在6-24小时内间断补加,大大提高了GABA的产量和谷氨酸转化率。本发明不仅将谷氨酸的积累和GABA的合成简化为一步发酵,简化了GABA生产过程、降低了生产成本;而且后期发酵优化明显提高了GABA的产量,使得L-谷氨酸的转化率达到74%,再次验证此生产方法的可行性和优势,为工业化应用打下良好基础。
- 1.一种发酵生产γ-氨基丁酸的方法，其特征在于以表达谷氨酸脱羧酶的基因工程菌为生产菌株，经种子培养基活化，菌株浓度到达对数生长中后期后，接种到发酵培养基，控制尿素起始浓度为***％，发酵起始6h-24h补加尿素***％/次，直到其浓度为***％停止；调节发酵温度为30℃，往复式摇床110rpm，连续培养120小时；所述表达谷氨酸脱羧酶的基因工程菌的构建方法为化学全合成或PCR方法获得谷氨酸脱羧酶基因gadB1、gadB2，将其通过表达载体共同导入谷氨酸棒杆菌ATCC13032；所述表达载体为pDXW-10；所述种子培养基组成为：种子培养基质量分数％：葡萄糖***，玉米浆3，尿素***，K2HPO4·3H2O ***，MgSO4 ***，pH ***；所述发酵培养基组成为：发酵培养基质量分数％：葡萄糖10，玉米浆***，尿素***，K2HPO4·3H2O ***，MgSO4 ***，MnSO4·7H2O ***，FeSO4·7H2O ***，pH ***。
- 2.权利要求1所述的方法，其特征在于所述谷氨酸脱羧酶基因gadB1、gadB2核苷酸序列分别如NCBI公布的LVIS_1847和LVIS_0079所示。
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