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一种生物酶法制备高凝胶强度κ-卡拉胶的方法

发布时间: 2022-05-16

基本信息

合作方式： 技术转让
成果类型： 发明专利
行业领域：
其他
成果介绍
  • 1.一种生物酶法制备高凝胶强度κ-卡拉胶的方法，其特征是，包括以下工艺步骤： (1)将新鲜的红藻液氮条件下研磨至60～100目细粉状，加入pH8～10的Tris-HCl缓冲溶液，红藻与Tris-HCl缓冲溶液的料液比为1g∶2～5ml，在0～4℃搅拌12～24小时，提取植物内源性D-半乳糖-6-硫酸化酶；0～4℃条件下冷冻离心，向离心后的上清液中加入(NH4)2SO4形成60～80％硫酸铵饱和溶液；饱和溶液，放置6～12小时自然沉淀； (2)将步骤(1)得到的沉淀复溶于pH6～8的Tris-HCl缓冲溶液中，料液比为1mg∶1～5ml，酶液加入到琼脂糖基质的苯基疏水柱中，用盐水溶液进行线性洗脱，流速为***～***；收集活性部分加入到弱碱性阴离子交换柱中，用盐水溶液进行线性洗脱，流速为***～***，收集活性部分-10～-60℃条件下冷冻干燥12～24小时，得到D-半乳糖-6-硫酸化酶，备用； (3)向卡拉胶溶液中加入D-半乳糖-6-硫酸化酶，卡拉胶溶液的浓度为***％～***％，D-半乳糖-6-硫酸化酶的加入量为1～100mg/kg(以卡拉胶质量计)，于25～60℃催化反应8～12小时，得到酶处理的卡拉胶溶液；将上述卡拉胶溶液浓缩、干燥、粉碎后即得到所述的高凝胶强度κ-卡拉胶。
  • 2.如权利要求1所述的生物酶法制备高凝胶强度κ-卡拉胶的方法，其特征是：所述红藻为叉菜(Chondrus)、麒麟菜(Eucheuma)、杉藻(Gigartina)或沙菜(Hypena)。
  • 3.如权利要求1所述的生物酶法制备高凝胶强度κ-卡拉胶的方法，其特征是：所述琼脂糖基质的苯基疏水介质为苯基-琼脂糖凝胶(Phenyl-Sepharose)、苯基-琼脂糖CL-4B凝胶(Phenyl-Sepharose CL-4B)或苯基-琼脂糖6FF凝胶(Phenyl-Sepharose6Fast Flow)，所用的盐为(NH4)2SO4，其浓度为***～2M(NH4)2SO4。
  • 4.如权利要求1所述的生物酶法制备高凝胶强度κ-卡拉胶的方法，其特征是：所述弱碱性阴离子交换介质为二乙氨基乙基-葡聚糖A-50凝胶(DEAE-SephadexA-50)、二乙氨基乙基-琼脂糖CL-6B凝胶(DEAE-Sepharose CL-6B)或二乙氨基乙基生物A凝胶(DEAE Bio-Gel A)，所用盐为NaCl，其浓度为***～***。
  • 5.如权利要求1所述的生物酶法制备高凝胶强度κ-卡拉胶的方法，其特征是：步骤(3)中，所述浓缩的条件为45～60℃条件下真空浓缩***～2小时，真空度为***～***；干燥条件是45～60℃条件下真空干燥3～6小时，真空度为***～***；粉碎至80-120目得到产品。
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