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乙偶姻高耐受性菌株的选育和用该菌株发酵生产乙偶姻

发布时间: 2022-05-16

基本信息

合作方式： 技术转让
成果类型： 发明专利
行业领域：
其他
成果介绍
  • 1.乙偶姻高耐受性解淀粉芽孢杆菌的选育，包括以下步骤： (1)亚硝基胍诱变 将本实验室筛选并保藏的解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens FMME044作为出发菌株制备菌悬液，并将其与不同浓度的亚硝基胍反应，一段时间后，终止反应再进行后培养； (2)驯化 在驯化培养基里添加不同浓度的乙偶姻，制成不同浓度的乙偶姻发酵液，将上述后培养的菌悬液添加到含有低浓度乙偶姻的培养基中，培养一段时间后再转接到相同乙偶姻浓度的培养基中，每个浓度转接三次之后，再转接到含有相对高浓度乙偶姻的培养基中，重复此操作，直到培养基中乙偶姻浓度达到80g/L；将上述驯化所得的菌悬液直接涂布到含高浓度乙偶姻的平板上； (3)筛选 在高浓度乙偶姻平板上能够长出的单菌落即为能耐高浓度乙偶姻的菌株；然后，挑取单菌落进行发酵验证并将高产菌株进行二次验证，筛选出35株比出发菌株高产且能耐受高浓度乙偶姻的菌株，其中菌株E-11生产乙偶姻的能力最强。
  • 2.根据权利要求1所述，其筛选得到生产乙偶姻菌株，经形态学、生理生化鉴定为解淀粉芽孢杆菌，并命名为*** E-11。
  • 3.一种乙偶姻的生产方法，其特征是采用*** E-11为出发菌株，以种子培养和液体发酵生产乙偶姻； 1)种子培养： 种子培养基以g/L计：葡萄糖10，牛肉膏5，蛋白胨5，初始***； 培养条件：温度37℃、摇床转速200rpm条件下，培养12h； 2)液体发酵培养： 发酵培养基以g/L计：葡萄糖140，蛋白胨***，酵母粉***，NaCl 5，K2HPO43，MgSO4·***，初始***； 发酵条件：接种量10％(v/v)，温度37℃、摇床转速200rpm条件下，发酵60-72h； 3)7L发酵罐发酵培养： 发酵培养基以g/L计：葡萄糖140，蛋白胨***，酵母粉***，NaCl 5，K2HPO43，MgSO4·***，初始***； 7L发酵罐中发酵培养基装液量为4L，接种量10％(v/v)，温度为37℃，搅拌转速为400r/min，通气量为***，过程中不控制pH，培养时间32-48h。
成果亮点
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