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一种利用固定化拟无枝酸菌转化阿魏酸生产香草醛的方法
一种利用固定化拟无枝酸菌转化阿魏酸生产香草醛的方法
发布时间: 2022-05-16
基本信息
合作方式:
技术转让
成果类型:
发明专利
行业领域:
其他
成果介绍
1.一种利用固定化拟无枝酸菌转化阿魏酸生产香草醛的方法,其步骤包括: (1)种子培养:将拟无枝酸菌(Amycolatopsis sp.)zhp06,即CCTCC NO:M 2011265,斜面菌种接种到种子培养基中,放置到28-45℃,100-300 r/min的恒温摇床中培养10~36 h; (2)菌体准备:将步骤(1)所得种子接种到菌体扩大培养基中,放置到28-45℃,100-300 r/min的恒温摇床中培养10~36 h; 所述种子培养基和种子扩大培养基配方为:葡萄糖1~10 g,酵母膏5~20 g,Na2HPO4 ·12H2O 1~10 g,KH2PO4 ***~2 g,NaCl ***~*** g,MgSO4·7H2O ***~*** g,CaCl2·2H2O ***~*** g;用自来水定容到1 L,调pH至***~***,121℃灭菌20 min;接种量为1%-10%; (3)固定化细胞制备:将用清水洗净的木屑或甘蔗渣纤维质材料粉碎成粒径为20目到120目,清水清洗干净后灭菌,用量为60-300 g/L加入到培养好菌体的步骤(2)所得培养液中,常温搅拌吸附1-24 h,过滤得到固定化细胞; (4)转化阿魏酸为香草醛:以步骤(3)中得到的固定化细胞为催化剂,加入底物阿魏酸溶液,在35-40℃下进行转化反应; 底物阿魏酸溶液组成:K2HPO3 3~6 g/L,KH2PO3 ***~1 g/L,底物阿魏酸5-50 g/L,初始pH为***,在摇瓶或发酵罐中进行反应; 摇瓶转化:装液量30-100 mL/ 250-500 mL三角瓶,转速100-300 r/min,转化10-48 h; 或发酵罐中转化:在发酵罐中反应,发酵罐通气量100-400 L/h,转速100-300 r/min,连续转化140-200 h。
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