一种电转化感受态细胞的制备方法及转化方法
发布时间: 2022-05-13
基本信息
一种电转化感受态细胞的制备方法,首先将大肠杆菌接种于1mL LB液体培养基,振荡培养过夜后接种到100mL2×YT液体培养基,振荡培养至OD600值为***,得到菌液;接着转移至预冷的50mL离心管中,冰上静置后离心,弃上清,回收菌体;加入50mL预冷1mM HEPES,重悬菌体,离心,弃上清,回收菌体,重复该步骤一次;往每个弃上清后的离心管中加入5mL预冷的含有10%甘油的1mM HEPES重悬菌体,离心,弃上清,接着加入300μL预冷的、含有10%甘油的无菌水重悬菌体,即得。本发明方法操作简单,转化效率高,可重复性高,转化效率大于1010cfu/ug,适用于普通实验室。
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