本发明公开了一种双细胞耦合催化生产戊二酸的方法。该方法包括以下步骤:步骤1,构建重组菌株*** BL22AB和*** BLYDT;步骤2,选取重组菌株*** BL22AB和*** BLYDT加入催化L赖氨酸反应生产戊二酸。与现有技术相比,本发明公开了一种双细胞耦合催化生产戊二酸的方法,通过将DavAB和GabDT分开表达在两个细胞中,利用双细胞耦合催化生产的方式,使得中间产物5氨基戊酸的积累减少,终产物戊二酸的产量提高。相比于将DavAB和GabDT共表达在一个细胞中,戊二酸的摩尔收率提高了***%。