您所在的位置:
成果库
一种恒温快速扩增检测单核细胞增生李斯特菌的方法
成果介绍
- 1.一种实时荧光定量赖解旋酶恒温核酸扩增(HDA)检测单核细胞增生李斯特菌的检测方法,其特征在于:设计对单增李斯特菌具有特异性扩增功能的引物对序列,建立实时荧光HDA检测方法,以单核细胞增生李斯特菌基因组DNA为模板,进行特异性恒温核酸扩增;通过基因组DNA的恒温扩增曲线及熔解曲线,分析检测结果,快速检测单核细胞增生李斯特菌。
- 2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的对单核细胞增生李斯特菌有特异性扩增的引物对序列分别是:上游引物:TCAGTGAGGGGAAAATGCAAGAAG;下游引物:CAGCTTTGCCGAAAAATCTGGAAGG。
- 3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的实时荧光HDA检测方法中,引物终浓度为***μmol/L。
- 4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的实时荧光HDA反应体系中,荧光染料为EvaGreen。
- 5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的单核细胞增生李斯特菌基因组DNA的提取方法可以是试剂盒法、传统DNA抽提法(酚-氯仿法)、)离子螯合剂(Chelex-l00)抽提法、热裂解法;优选热裂解法。
- 6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的定量方法为实时荧光检测,测得相对荧光信号强度的对数log(ΔRn)与扩增循环数(Cycle)建立单核细胞增生李斯特菌的对数曲线关系。
成果亮点
团队介绍
成果资料