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具有低转化副产物的麦芽糖淀粉酶的突变体及突变方法
发布时间: 2022-05-12
基本信息
合作方式：
技术转让
成果类型：
发明专利
行业领域：
其他
成果介绍
- 1.一种麦芽糖淀粉酶的突变体，其特征在于，所述麦芽糖淀粉酶的亲本氨基酸序列与NCBI数据库中编号为1QHO_A的嗜热脂肪芽孢杆菌麦芽糖淀粉酶一致，所述突变是将第177位色氨酸突变为苯丙氨酸，命名为W177F。
- 2.一种麦芽糖淀粉酶的突变体，其特征在于，所述麦芽糖淀粉酶的亲本氨基酸序列与NCBI数据库中编号为1QHO_A的嗜热脂肪芽孢杆菌麦芽糖淀粉酶一致，所述突变是将第177位色氨酸突变为酪氨酸，命名为W177Y。
- 3.一种麦芽糖淀粉酶的突变体，其特征在于，所述麦芽糖淀粉酶的亲本氨基酸序列与NCBI数据库中编号为1QHO_A的嗜热脂肪芽孢杆菌麦芽糖淀粉酶一致，所述突变是将第177位色氨酸突变为亮氨酸，命名为W177L。
- 4.一种麦芽糖淀粉酶的突变体，其特征在于，所述麦芽糖淀粉酶的亲本氨基酸序列与NCBI数据库中编号为1QHO_A的嗜热脂肪芽孢杆菌麦芽糖淀粉酶一致，所述突变是将第177位色氨酸突变为天冬氨酸，命名为W177N。
- 5.一种麦芽糖淀粉酶的突变体，其特征在于，所述麦芽糖淀粉酶的亲本氨基酸序列与NCBI数据库中编号为1QHO_A的嗜热脂肪芽孢杆菌麦芽糖淀粉酶一致，所述突变是将第177位色氨酸突变为丝氨酸，命名为W177S。
- 6.权利要求1-5所述的突变体的制备方法，包括如下步骤： 1)在嗜热脂肪芽孢杆菌麦芽糖淀粉酶氨基酸序列的基础上确定突变位点；设计定点突变的突变引物，以携带麦芽糖淀粉酶基因的载体为模板进行定点突变并构建含突变体的质粒载体； 2)将突变质粒转化进宿主细胞； 3)挑选阳性克隆进行发酵培养，并纯化麦芽糖淀粉酶突变体； 所述质粒载体为pUC系列，pET系列，或pGEX中的任意一种；所述宿主细胞为细菌和真菌细胞；所述细菌为革兰氏阴性细菌或革兰氏阳性细菌。
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