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一种利用葡萄糖发酵产反式-4-羟脯氨酸的方法
成果介绍
- 1.一种提高含有重组DNA的反式-4-羟脯氨酸生物合成系统活性的方法,其中的含有重组DNA的反式-4-羟脯氨酸生物合成系统是通过将proBA2、hyp重组到载体上并转入微生物细胞共表达,得到具有反式-4-羟脯氨酸生物合成活性增强的重组微生物。
- 2.权利要求1所述的重组微生物中的两个基因共表达策略,可以是重组于同一个载体上的两个基因的共表达,也可以是分别重组于两个不同抗性载体的两个基因的共表达。
- 3.权利要求1所述的增强反式-4-羟脯氨酸生物合成系统活性的方法,其特征在于通过导入proBA2以及hyp并增加重组微生物中的两个基因的拷贝数来实现。
- 4.权利要求3所述的增加proBA2以及hyp在重组微生物中的拷贝数的方法,其特征是将两个基因连重组到一个或两个多拷贝质粒来实现。
- 5.权利要求2、4所述的载体、多拷贝质粒包括但不局限于pET-28a、pUC19、pKYP10等。
- 6.反式-4-羟脯氨酸的生产方法,其特征是将权利要求1、2、3、4所述的重组微生物在培养基上培养,将得到的培养物、菌体或者它们的处理物作为酶源,在葡萄糖存在下,于水性介质中使葡萄糖转化为L-脯氨酸,再从L-脯氨酸转化为反式-4-羟脯氨酸,最后从该水性介质中提取生成的反式-4-羟脯氨酸。
- 7.权利要求1、2、3、4所述的重组微生物包括但不局限于大肠杆菌属、棒状杆菌属、假单胞菌属、芽孢杆菌、酵母菌等。
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