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一种麦芽寡糖基海藻糖合成酶突变体及其应用

发布时间: 2022-04-01

基本信息

合作方式: 技术转让
成果类型: 发明专利
行业领域:
其他
成果介绍

本发明公开了一种麦芽寡糖基海藻糖合成酶突变体及其应用,属于基因工程和酶工程技术领域。本发明提供了一系列酶活提高的麦芽寡糖基海藻糖合成酶突变体。

  • 1.一种麦芽寡糖基海藻糖合成酶的突变体,其特征在于,将SEQ ID ***所示的麦芽寡糖基海藻糖合成酶第81位置的甘氨酸(Gly)变成丝氨酸(Ser)。
  • 2.一种麦芽寡糖基海藻糖合成酶的突变体,其特征在于,将SEQ ID ***所示的麦芽寡糖基海藻糖合成酶第81位置的甘氨酸(Gly)变成丝氨酸(Ser)、将第284位置的苯丙氨酸(Phe)变成缬氨酸(Val)并将第615位置的丝氨酸(Ser)变成甘氨酸(Gly)。
  • 3.一种麦芽寡糖基海藻糖合成酶的突变体,其特征在于,将SEQ ID ***所示的麦芽寡糖基海藻糖合成酶第81位置的甘氨酸(Gly)变成丝氨酸(Ser)、将第284位置的苯丙氨酸(Phe)变成缬氨酸(Val)并将第439位置的苏氨酸(Thr)变成丙氨酸(Ala)、将第615位置的丝氨酸(Ser)变成甘氨酸(Gly)。
  • 4.一种麦芽寡糖基海藻糖合成酶的突变体,其特征在于,将SEQ ID ***所示的麦芽寡糖基海藻糖合成酶第81位置的甘氨酸(Gly)变成丝氨酸(Ser)、将第284位置的苯丙氨酸(Phe)变成缬氨酸(Val)、将第586位置的甘氨酸(Gly)变成天冬氨酸(Asp)并将第615位置的丝氨酸(Ser)变成甘氨酸(Gly)。
  • 5.编码权利要求1~4任一所述突变体的基因。
  • 6.携带权利要求5所述基因的载体或重组细胞。
  • 7.制备权利要求1~4所述突变体的方法,其特征在于,包括如下步骤: (1)根据确定的突变位点,设计定点突变的突变引物,以携带麦芽寡糖基海藻糖合成酶基因的载体为模板进行定点突变;构建含有编码突变体的基因的质粒载体; (2)将突变体质粒转化进宿主细胞; (3)挑选阳性克隆进行发酵培养,离心收集细胞,细胞破壁上清液即为麦芽寡糖基海藻糖合成酶突变体的粗酶液。
  • 8.权利要求1~4任一所述突变体在生产海藻糖中的应用。
  • 9.权利要求5所述基因在生产海藻糖中的应用。
  • 10.权利要求6所述载体或重组细胞在生产海藻糖中的应用。
  • 11.生产海藻糖的酶制剂,其特征在于,包括权利要求1~4任一所述突变体。
成果亮点
团队介绍
成果资料