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一种酶活性提高的丙酮酸羧化酶突变体N1078F及其应用

发布时间: 2022-04-01

基本信息

合作方式: 技术转让
成果类型: 发明专利
行业领域:
其他
成果介绍

本发明公开了一种酶活性提高的丙酮酸羧

化酶突变体N1078F及其应用,属于遗传工程和发

酵工程领域。本发明将米根霉的丙酮酸羧化酶的

N1078位点突变成了苯丙氨酸,得到的突变体酶

活提高了***%。在敲除PDC1和ADH1的基础上敲

除基因FUM1,同时过量丙酮酸羧化酶突变体

N1078F,发现延胡索酸产量提高了***%。该发

明有效强化了碳代谢流由丙酮酸进入延胡索酸

的合成途径,为构建工程酵母高效生产延胡索酸

及其它二元羧酸创造了条件,具有很好的工业应

用价值和前景。

1.一种丙酮酸羧化酶突变体,其特征在于,所述突变体是在氨基酸序列如SEQ ID ***

所示的丙酮酸羧化酶的基础上,将第1078位的天冬酰胺突变成为苯丙氨酸。

2.编码权利要求1所述突变体的基因。

3.携带权利要求2所述基因的载体。

4.携带权利要求2所述基因的细胞。

5.表达权利要求1所述丙酮酸羧化酶突变体的基因工程菌,其特征在于,以酿酒酵母为

宿主。

6.权利要求5所述的基因工程菌在食品、饲料、化工、制药领域的应用。

7.权利要求1所述突变体在食品、饲料、化工、制药领域的应用。

8.一种利用权利要求1所述突变体促进延胡索酸积累的方法,其特征在于,是在编码丙

酮酸脱羧酶PDC1、乙醇脱氢酶ADH1和延胡索酸酶FUM1的基因同时缺失的酵母菌中,过表达

所述丙酮酸羧化酶突变体。

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