CRIPSR/Cas9系统中重组sgRNA骨架载体的构建方法

本发明提供了CRIPSRCas9系统中重组sgRNA骨架载体的构建方法，其能解决现有构建方法操作要求以及试剂配制要求较高受，普通技术人员获得的菌株阳性率低，阳性菌株挑选费时费力的技术问题。CRIPSRCas9系统中重组sgRNA骨架载体的构建方法，其包括以下步骤：（1）制备线性化的sgRNA空质粒；（2）制备区分片段；（3）制备重组sgRNA骨架载体；（4）挑选重组sgRNA骨架载体；其特征在于：所述步骤（2）的区分片段包含sacB基因及其开放阅读框（ORF）、启动子和终止子。