一种L-氨基酸脱氨酶突变体的制备及其应用

本发明公开了一种L‑氨基酸脱氨酶突变体的制备及其应用，属于基因工程技术领域。本发明的改造方法通过pmirLAAD的蛋白质改造，通过分析pmirLAAD产物结合位点周围柔性Loop环结构，并设计最佳突变体，克服了之前野生型的酶由于产物抑制而导致催化效率的降低，并通过实验验证。最终得到最佳突变体pmirLAADM4，催化效率(***‑1·min‑1)和产物抑制常数(***)较对照分别提高了***倍和***倍。α‑酮异戊酸的产量可达到***，转化率>97％用本发明的方法可以大大降低成本，加快了酶转化法生产α‑酮异戊酸的工业化进程。