科创中国

生物与新医药技术

本发明公开了黑曲霉、其α‑L‑鼠李糖苷酶制备方法及质粒载体及重组菌，所述α‑L‑鼠李糖苷酶来源于所述黑曲霉，所述α‑L‑鼠李糖苷酶核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明通过筛选获得水解柚皮苷的菌株黑曲霉WDQ‑1，并从其中获取了编码α‑L‑鼠李糖苷酶的基因，通过毕赤酵母高密度发酵，获得大量的α‑L‑鼠李糖苷酶，本发明构建重组菌毕赤酵母GS115/pPIC9K‑rha和GS115‑rha+vgb‑3，在3‑L发酵罐高密度发酵，发酵液产酶活性达到19000U/mL以上，展现良好的工业化前景。

要获得纯的α-L-鼠李糖苷酶，操作难度大，分离纯化的成本较高，目前还没有工业化生产。目前市场上销售的α-L-鼠李糖苷酶粗酶液一般都是含有α-L-鼠李糖苷酶的柚苷酶，纯的α-L-鼠李糖苷酶从国外进口，价格昂贵。本发明通过筛选获得水解柚皮苷的菌株黑曲霉 WDQ-1，并从其中获取了编码α-L-鼠李糖苷酶的基因，通过毕赤酵母高密度发酵，获得大量的α-L-鼠李糖苷酶，本发明构建重组菌毕赤酵母 GS115/pPIC9K-rha和GS115-rha+vgb-3，在3-L发酵罐高密度发酵，发酵液产酶活性达到19000U/mL以上，展现良好的工业化前景。

研究团队长期从事生物催化与发酵工程领域的研究，主要承担《生物催化工艺学》、《有机酸工艺学》、《生物催化与手性技术》等课程的讲授工作。以责任作者或第一作者发表论文70余篇，其中SCI收录论文23篇；申请发明专利48项，授权发明专利31项，其中国际发明专利3项；参编专著1部。主持江苏省产学研合作项目等省部级、企业合作科研项目十余项；作为主要成员参加完成国家973计划、863计划、国家自然科学基金项目、国家科技支撑计划项目、企业合作项目等十余项。获得江苏省科技进步奖2项、中国商业联合会科学技术奖2项、中国石油和化学工业联合会技术发明和科学技术奖各1项、中国轻工业联合会科学技术进步奖1项、海南省科技进步奖1项，指导学生获得江苏省优秀硕士学位论文奖1项。